Анализы методом ПЦР: как проводят исследование и на какие инфекции?

24/02/2016 08:11 МедУрфо

ПЦР-диагностика В современной медицине большее значение уделяется высокоточной лабораторной методике исследования, основанной на Полимеразной Цепной Реакции. Благодаря применению ПЦР – технологий появилась возможность провести анализ на молекулярно-генетическом уровне и выявить у пациента острые и хронические формы наследственных и инфекционных заболеваний задолго до появления клинических симптомов.



Что такое ПЦР – диагностика

Этот метод был разработан американским биохимиком и лауреатом Нобелевской премии Кэрри Мюллисом в 1984 году.

Многие квалифицированные специалисты сталкиваются с ПЦР-исследованием каждый день и не представляют без его результатов точного диагностирования большинства активных форм патологий в тех случаях, когда не срабатывают иммунологические и микробиологические методики. Очень часто бывает так, что разные вирусы могут вызвать одни и те же клинические симптомы, ПЦР-анализ позволит определить возбудитель при самой малой его концентрации в биоматериале и выявить даже единичные клетки вирусов или бацилл.

О ПЦР-диагностики на видео

Основу ПЦР-диагностики представляет проведение в специальных лабораторных условиях многократной амплификации (умножения) определенных участков ДНК (дезоксирибонуклеиновой кислоты) — генетического материала человека.

Весь технологический процесс копирования состоит из несколько этапов:

  1. Денатурации – подготовке образца, посредством повышения температуры биоматериала (до 95 °C) происходит расщепление 2-х цепочной ДНК на две отдельные нити.
  2. Отжига — исследуемый биоматериал остужают и добавляют к нему азотистые праймеры (реагенты), имеющие способность специфично распознавать последовательности в молекуле ДНК, характерные только для болезнетворного агента, и соединяться с ними.
  3. Элонгации – самой полимеразной реакции, происходит достраивание уникального молекулярно-генетического участка, в каждом из соединений с праймером образуется новая, структурно дополняющая дочернюю, цепь ДНК.

Весь цикл повторяется 20 – 30 раз. В конечном итоге образуется то количество комплементарных нитей ДНК, которое достаточно для визуального анализа и сравнения результатов с имеющимися данными о клеточном строении различных возбудителей. Определяют вирус, природу его появления, устанавливают силу его воздействия на организм и количество имеющихся бацилл. Эта информация представляет большую ценность для лечащего врача при назначении эффективных методов терапии и подборе лекарственных препаратов.

Методики ПЦР – диагностики отличаются от других лабораторных методов следующим:

  • прямым определением наличия возбудителей;
  • высокой чувствительностью, специфичностью и универсальностью процедуры выявления вирусов;
  • быстротой выполнения анализа;
  • возможностью диагностирования бессимптомных патологий.

Результаты исследования можно фотографировать или вносить в информационные носители для возможности их оценивания независимыми экспертами.

Как правильно подготовиться к сдаче анализа ПЦР?

Для исследования используют различные биоматериалы:

  • кровь;
  • слизь;
  • слюну;
  • мочу;
  • мокроту;
  • соскобы эпителия;
  • сок простаты;
  • соскобы слизистых оболочек;
  • околоплодные воды;
  • ткань плаценты;
  • спинномозговую, суставную или плевральную жидкости;
  • выделения половых органов.

Современное лабораторное оборудование и профессионализм врача-лаборанта гарантирует пациенту, которому проводят ПЦР-анализ получение достоверного результата. Но точность исследования зависит и от правильной подготовки к тесту, и от соблюдения всех рекомендаций по отбору биоматериала.

Правильно подготовиться к анализу не сложно, важно выполнить все существующие правила:

  1. За сутки до исследования не вступать в половые контакты.
  2. Отменить занятия в спортзале.
  3. Не посещать перед обследованием баню или сауну.
  4. Ужинать накануне следует не позднее 20 часов, не увлекаться острой и жирной пищей, не принимать спиртное.
  5. Венозную кровь нужно сдавать в утренние часы, перед процедурой не есть, не пить и не курить.

Как сдают анализы ПЦР женщины и мужчины – особенности процедуры

Главным общим требованием к отбору биоматериала – получение в образец максимальной концентрации микроорганизмов и отсутствие нежелательных примесей – слизи, крови или гноя.

При обследованиях на инфекции, которые передаются при половых контактах (уреаплазмоз, гарднереллез,   хламидиоз, микоплазмоз, трихомониаз) забирают выделения из половых органов:

  • у мужчин производится взятие мазка или соскоба из мочевыводящего канала (уретры);
  • у женщин – мазка или соскоба из влагалища, цервикального канала.

При взятии материала из урогенитальных путей важно избежать попадания примесей. С этой целью у мужчин соскоб берут не ранее 2-х часов после последнего мочеиспускания, у женщин — с учетом дней цикла месячных. Избыток слизи или гноя удаляется стерильными ватными тампонами, биоматериал отбирают при помощи специальных пластиковых зондов – при этом снижается вероятность попадания крови в образец.

Процедура взятия урогенитального соскоба довольно болезненна для мужчин, именно поэтому для анализа часто используется первая порция мочи после ночной задержки, которая содержит наибольшее количество эпителия. Мочу собирают в стерильный контейнер с плотно прилегающей крышкой и доставляют в лабораторию не позднее, чем спустя два часа после отбора. В лаборатории для последующей работы получают клеточный осадок мочи путем центрифугирования.

Какие инфекции входят в комплекс ПЦР-12?

ПЦР-диагностику активно используют опытные специалисты. Наиболее востребованной считается диагностика вирусов и инфекций.

Какие 12 инфекций можно выявить с помощью ПЦР-диагностики Что выявляется

;

ВИЧ-инфекция Вирус иммунодефицита человека, тип 1/2

;

Гепатиты А, В, С, G Вирусы гепатитов HAV, HBV, HCV, HGV

;

Мононуклеоз Вирус Эпштейна — Барра

;

Цитомегаловирусная инфекция Возбудитель — Cytomegalovirus
Герпетическая инфекция Вирус простого герпеса, тип 1/2

;

ИППП – инфекции, которые передаются половым путем Патогенные микробы — уреаплазма, гарднеллера, хламидия, микоплазма, трихомонада
Туберкулез Микобактерия туберкулеза
Онкогенные вирусы Вирус папилломы человека — Human papillomavirus и его онкогенные виды (14 типов)
Боррелиоз Возбудитель клещевого энцефалита
Листериоз Возбудитель — Listeria monocytogenes
Кандидоз Грибы семейства Candida
Хеликобактерная инфекция Возбудитель — Helicobacter pylori

В настоящее время методики Полимеразной цепной реакции расширяют возможности проведения исследований — введение геннотипирования и сращивания фрагментов ДНК тканей получили широкое распространение в различных областях современной медицины:

  • гинекологии;
  • урологии;
  • пульмонологии;
  • гастроэнтерологии;
  • гематологии;
  • онкологии.

Где можно недорого сдать анализы в УРФО?

Название лечебного учреждения Примерная стоимость исследований Топ-12
Ситилаб, г. Тюмень 10980 руб.
Медицинская лаборатория «Инвитро», г. Миасс 11650руб.
Медлабэкспресс, г. Серов 11380 руб.
Клинико – диагностическая лаборатория «Хеликс», г. Екатеринбург 12240 руб.
«Независимая лаборатория прогрессивных медицинских технологий» г. Тюмень 12160 руб.
Медицинская лаборатория «ГЕМОТЕСТ», г. Челябинск 11810 руб.

Современные методы ПЦР-диагностики постоянно развиваются. Совершенствуется сама методика, происходит появление новых разновидностей ПЦР и новых тест – систем, используемых для цепной реакции. Благодаря этим нововведениям, стоимость этих анализов становится более доступной для пациентов.